pull do来自wn实验原理是什么?

RNApulldown实验原理：先将体外转录的RNA结合到Beads上，再将RNA-Beads和细胞裂解液孵育，这样与目标RNA结合的蛋白便会一起吸附在Be360问答ads上。

洗涤掉不结合的蛋白后，用洗脱液将RNA-protein复合物从Beads洗脱下来，之后可以采用We北绍损知使sternBlot技术检测特定的结合蛋白，还可以采用质谱方法鉴定与目标RNA结合的未知蛋白。

Pulldow首湖维识执里n实验方案设计：

1、构建含略集盾演不His或GST标签的诱饵蛋白原核表达载体。

2、原那亲核表达诱饵蛋白（我们采用自诱导培养基培养细菌，能有效降免真团无低包涵体的形成）。

3、细菌裂解液过柱，带标签的诱饵蛋白被固相化亲和配基捕获，产生“次级亲和支持物”。

4、待测样品裂解液过柱孵育，与诱饵蛋白互作的蛋白被“次级亲和支持物”吸附。

5、清洗，离心，去除未结合的杂蛋白。

6、洗脱，得到诱饵蛋白及其乙装项道讲款马真凯贵互作蛋白的复合物。

7、如要验证某蛋白X与诱饵蛋白互作，财凯则将6.所得的蛋白复合物与X蛋白的抗体女场树多左孵育，做Westernblo医材t验证即可。

8、如要寻找诱饵蛋白可能的互作蛋白，则需将6.所得的蛋白复合物做LC-MS/MS鉴定。

以上内容参考：百度百科-GSTpull-downassay

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