1.第一步,看箭头:
大多数质粒都会有箭头,箭头有两种解释。一种是转录方向,转录方向主要是由启动子开始的一个大箭头,是启动子启动序列的顺序。另一种是复制起始位点的方向,复制起始位点就是该质粒在大肠杆菌等细菌或真菌中DNA复制的一个方向。
还需要提到的是F1启动子(图上的f1 ori)代表的是噬菌体的复制起始方向,只能复制出单链的DNA哦,但是可以用来测序。看懂转录的方向,这样就方便设计插入片段的位置和方向性。
2.第二步,看上面的标签。
报告基...
第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒)
Ori的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向)。
第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记:
(1)Ampr:水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。
(2)tetr :可以阻止四环素进入细胞。
(3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮霉素β失...
方法一:使用Vector NT 软件
做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱。方法二:查找质粒图谱的网站 Vector Database(addgene)
这个网站很页面很人性化,以前叫做lab...
一、一个合格质粒的组成要素 复制起始位点Ori,即控制复制起始的位点。原核生物DNA 分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA 分子有多个复制起始位点。 抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 多l 克隆位点:MCS 克隆携带外源基因片段 P/E:启动子/增强子 Terms:终止信号 加poly(A)信号:可以起到稳定mRNA 作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori 的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭...
标签:质粒